Instrument Sanger Sequelecing

Le séquençage de Sanger, qui a été utilisé pour le séquençage des nucléotides d'ADN, a été créé et récompensé Nobel Prix par Frederick Sanger en 1977.
Comment fonctionne le séquençage Sanger?
Tout d'abord, nous utilisons l'amorce pour avoir une courte liaison d'amorce à côté de la région d'intérêt sur le modèle d'ADN. Ensuite, l'ADN polymérase commence à s'accumuler à partir de l'amorce en ajoutant des nucléotides complémentaires au brin d'ADN.
Pour trouver l'arrêt qui nous permet d'identifier la base de la toute fin du fragment d'ADN particulier. Le principe de séquençage de Sanger est appliqué pour éliminer un atome d'oxygène du ribonucléotide. Le DDNTP (didésoxynucléotide) consiste à mettre une clé dans un engrenage. L'enzyme de polymérase n'ajoutera plus de nucléotides normaux à cette chaîne d'ADN. L'extension s'arrêterait.
Nous pouvons identifier la chaîne terminant les nucléotides par un colorant fluorescent spécifique. L'analyseur génétique des Superyears peut soutenir le colorant fluorescent jusqu'à 6/8 couleurs pour être exact.
Le séquençage Sanger entraîne la formation de produits d'extension de différentes longueurs terminées avec des didésoxynucléotides à l'extrémité 3 '.
L'électrophorèse capillaire sépare les produits d'extension.
Un courant électrique injecte les molécules dans un tube capillaire long rempli d'un polymère de gel.
Pendant CE (électrophorèse capillaire), les fragments d'ADN chargés négativement se déplacent vers l'électrode positive.
La vitesse à laquelle un fragment d'ADN migre à travers le milieu est inversement proportionnel à son poids moléculaire.
Ce processus peut séparer les produits d'extension par taille à une résolution d'une base.
Un laser excite les fragments d'ADN marqués au colorant alors qu'ils traversent une petite fenêtre à la fin du capillaire.
Le colorant excité émet de la lumière à une longueur d'onde caractéristique détectée par un capteur de lumière.
Le logiciel peut interpréter le signal détecté et le traduire dans un contexte basé.
Une réaction de séquençage est réalisée en présence des quatre nucléotides terminés, un pool de fragments d'ADN qui sont mesurés et séparés par base.
Fichier de données montrant la séquence de l'ADN dans un électrophérogramme coloré.

Sur la base du principe de séquençage de Sanger, l'analyseur de gènes produits par le gène Superyears peut être utilisé pour l'analyse de séquence de gènes et l'analyse des fragments, qui peut rapidement détecter les gènes multi-cibles (10-70 loci) à la fois. La génération L'analyseur Etic a les avantages d'un faible coût de détection unique, d'un fonctionnement simple et d'une interprétation intuitive et simple des résultats. Il s'agit d'un outil puissant pour l'inspection des articulations moyennes et multi-gènes.

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