Analyseur d'instruments d'analyse clinique médicale Analyseur de gènes

Analyseur d'instruments d'analyse clinique médicale Analyseur de gènes

Description de l'analyseur génétique

La méthode MLPA (Multiplex Ligation dépendante de la sonde-amplification) détecte les modifications de nombres de copies multiples de gènes ou de sites de loci. De nos jours, la MLPA est utilisée pour vérifier un grand nombre de troubles héréditaires et de profilage tumoral. Depuis que le scientifique néerlandais Jan Schouten l'a inventé pour la première fois, la méthode MLPA a été publiée pour la première fois dans la «recherche en acides nucléiques» de 2002. Le principe de la MLPA est d'appliquer la conception de sonde spécifique ciblant une région d'intérêt sur chaque échantillon ADN. La méthode MLPA se compose des étapes suivantes:

Dénaturation> ligature d'hybridation> Amplificons MLPA PCR> Électrophorèse capillaire> Analyse des données

Nous utilisons l'échantillon d'ADN mis dans le thermocycleur pour séparer les brins d'ADN. Ensuite, le brin d'ADN ciblé sera hybridé en additionnant les oligonucléotides de sonde gauche et droite. L'enzyme ligase liera immédiatement les oligos de sonde à la cible adjacente sur l'ADN de l'échantillon. Par conséquent, l'oligo de sonde gauche et droite hybride commence à catalyser la création d'une liaison covalente entre les deux. Une fois les oligos de sonde scellés, les sondes MLPA seront amplifiées de façon exponentielle à l'aide de la paire d'amorces PCR unique.

La réaction de PCR se compose des trois étapes: dénaturation, recuit des amorces et allongement de l'amorce. Ces étapes de l'amplification par PCR sont répétées plusieurs fois. L'amorce marquée par fluorescence est incorporée dans la taille des produits d'amplification qui passeront par l'électrophorèse capillaire pour passer un détecteur. La fluorescence mesurée est visualisée comme un motif de pointe, le soi-disant électrophérogramme. Les données brutes de l'analyseur d'électrophorèse capillaire constituent l'entrée de l'analyse MLPA.

Affichage de l'analyseur d'ADN