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Nanjing Superyears Gene Technology Co., Ltd. [Jiangsu,China] Type d'Affaires:Fabricant , Service , Société de commerce principaux marchés: Afrique , Asie , Europe de l'Est , L'Europe  , moyen-Orient , Europe du Nord , Europe occidentale , À l'échelle mondiale Exportateur:41% - 50% certs:ISO13485, ISO14001, ISO9001, CE, MSDS, FSC, CCC, EMC, Test Report

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L'utilisation d'un thermocycleur PCR à 5 canaux PCR PCR en temps réel PCR

2023-07-17

Real Time Pcr

L'utilisation d'un thermocycleur à 5 canaux PCR PCR en temps réel PCR implique les étapes suivantes:

1. Préparation de l'échantillon: extraire l'ADN ou l'ARN de l'échantillon biologique d'intérêt. Cela peut être fait en utilisant diverses méthodes telles que l'extraction du phénol-chloroforme, la purification basée sur les colonnes ou la purification magnétique basée sur les billes.
2. Conception d'amorce et de sonde: concevoir des amorces et des sondes spécifiques qui se lieront à la séquence cible d'intérêt. Ces amorces et sondes sont généralement conçues à l'aide d'outils logiciels qui tiennent compte des facteurs tels que la température de fusion, le contenu GC et la spécificité.
3. Configuration de la réaction de PCR: Préparez le mélange de réaction de PCR en combinant la matrice d'ADN ou d'ARN, les amorces, les sondes et d'autres composants nécessaires tels que les nucléotides, le tampon et la polymérase. Le mélange réactionnel est ensuite distribué dans les puits de la plaque de PCR.
4. Thermocyclage: placez la plaque de PCR dans le thermocycleur à 5 canaux, qui peut accueillir plusieurs échantillons simultanément. Le thermocycleur passera ensuite par une série de cycles de température, notamment la dénaturation, le recuit et l'extension, pour amplifier la séquence d'ADN ou d'ARN cible.
5. Surveillance en temps réel: le thermocycleur à 5 canaux est équipé de capacités de détection de fluorescence. Au cours de chaque cycle de température, le thermocycleur détecte la fluorescence émise par la sonde marquée car elle se lie à l'ADN ou à l'ARN amplifié. Cela permet une surveillance en temps réel du processus d'amplification.
6. Analyse des données: les données de fluorescence en temps réel sont collectées et analysées à l'aide d'un logiciel spécialisé. Le logiciel calcule la valeur de seuil de cycle (CT), qui représente le nombre de cycle auquel le signal de fluorescence traverse un seuil prédéfini. La valeur CT est utilisée pour quantifier la quantité initiale d'ADN ou d'ARN cible dans l'échantillon.
7. Interprétation des données: Les valeurs CT obtenues à partir du thermocycleur à 5 canaux peuvent être comparées entre différents échantillons ou conditions expérimentales. Cela permet la quantification des niveaux d'expression génique, la détection de mutations spécifiques ou de variations génétiques, ou la mesure de la charge virale, entre autres applications.
Dans l'ensemble, la PCR thermocycleur à 5 canaux PCR PCR en temps réel PCR est un outil puissant pour diverses applications de biologie moléculaire, fournissant une quantification rapide et précise des acides nucléiques.

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